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動(dòng)衛(wèi)所在新型豬偽狂犬亞單位疫苗研究方面取得新進(jìn)展
近日，動(dòng)衛(wèi)所在微生物學(xué)期刊Frontiers in Microbiology（二區(qū)，IF=5.2）發(fā)表了題為“Pseudorabies gD protein protects mice and piglets against lethal doses of pseudorabies virus”的研究性論文。該研究表明哺乳動(dòng)物細(xì)胞（HEK 293T）表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)生的gD蛋白具有良好的免疫原性，能刺激小鼠和仔豬體內(nèi)產(chǎn)生高水平的抗偽狂犬病毒特異性抗體和中和抗體，可以保護(hù)其應(yīng)對(duì)致死劑量的偽狂犬病毒攻擊，對(duì)新型偽狂犬疫苗的開(kāi)發(fā)具有重要意義。動(dòng)衛(wèi)所與華南農(nóng)業(yè)大學(xué)聯(lián)合培養(yǎng)的博士研究生趙夢(mèng)坡、動(dòng)衛(wèi)所陳晶副研究員、羅勝軍副研究員為論文共同第一作者，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)袁子國(guó)教授和動(dòng)衛(wèi)所王曉虎研究員為論文共同通訊作者。
偽狂犬病毒株系的不斷進(jìn)化，使得研究人員不斷在探索新型疫苗的研發(fā)。與原核表達(dá)相比，哺乳動(dòng)物細(xì)胞能正確處理自身表達(dá)的蛋白質(zhì)和外源蛋白質(zhì)，是體外獲得高活性蛋白質(zhì)的首選表達(dá)系統(tǒng)。研究小組與南方醫(yī)科大學(xué)李紅衛(wèi)教授團(tuán)隊(duì)合作，利用HEK 293T表達(dá)系統(tǒng)，對(duì)分泌表達(dá)在HEK 293T細(xì)胞上清中的gD蛋白進(jìn)行純化及鑒定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，gD蛋白可以刺激小鼠和仔豬產(chǎn)生高水平PRV-HY特異性抗體和中和抗體。用103TCID50劑量的PRV-HY對(duì)小鼠進(jìn)行攻毒，gD蛋白免疫組的所有小鼠均存活；用107TCID50劑量的PRV-HY對(duì)仔豬進(jìn)行攻毒，gD蛋白免疫組的所有仔豬均存活，且無(wú)典型的臨床癥狀。這表明該gD蛋白可誘導(dǎo)小鼠和仔豬機(jī)體產(chǎn)生的堅(jiān)強(qiáng)的免疫。此外，gD組仔豬鼻拭子和肛拭子中的病毒基因拷貝數(shù)明顯低于商品化疫苗組，且對(duì)環(huán)境的排毒周期更短（圖1）。
圖1攻毒后仔豬排毒量、組織病毒含量和存活率
與商品化疫苗組相比，gD免疫組仔豬淋巴結(jié)、肺、脾、肝、腎的病理變化較少，組織中感染PRV-HY的陽(yáng)性細(xì)胞較少（圖2）。主要原因在于gD蛋白能迅速誘導(dǎo)宿主機(jī)體產(chǎn)生較高水平的中和抗體。另一方面，ISA 201佐劑能有效刺激宿主產(chǎn)生強(qiáng)大的粘膜免疫，與gD蛋白具有一定的協(xié)同作用。該研究結(jié)果為開(kāi)發(fā)一種新型豬偽狂犬基因工程亞單位候選疫苗奠定了基礎(chǔ)。
圖2 攻毒后仔豬組織病理變化和HE染色
本研究得到了廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目（2021B1212050021）、“十四五”國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（2021YFD1801400）以及廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院協(xié)同創(chuàng)新中心項(xiàng)目（XTXM202202）等支持。
